低温寒害是王法农业坐褥的主要因子之一。低温会使叶绿素分解，细胞受到伤害黑丝，质膜相对透性增大[1]，叶绿素含量镌汰[1， 2， 3， 4]。叶绿体是低温挟制的径直地方[5]，低温消弱植物通过光协作用利用光能的身手[6， 7， 8]。植物在一定低温限度内通过提高保护酶含量来保管体内目田基产生与捣毁间的动态均衡。若低温挟制严重，就会导致目田基含量增高，酿成膜脂过氧化，丙二醛含量上涨，细胞膜系统受到伤害[9]。温度窘境也提醒植物自己具有的抗氧化物资，如过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽及抗坏血酸等含量上涨来回击窘境伤害[1， 10]。

生物对各式生物、理化及致病因子的应答，本色上皆是基因各别抒发的着力。比较消亡类细胞或不同类细胞在不同生理景色或滋长发育阶段下的基因抒发各别，对考虑生物滋长发育调控及代谢机制具有进攻道理[11]。连年来，利用mRNA 各别线路时候和基因芯顷然候等考虑窘境对作物滋长发育的影响取得了进攻进展，对作物窘境生理和遗传育种考虑说明了积极作用[12， 13， 14， 15， 16]。高通量测序的数字化基因抒发谱(Digital gene expression profile，DGE)时候是新发展起来的分析生物转录组基因抒发的法式，能愈加委果、全面地评价细胞中统统基因的抒发情况，也莽撞检测未知基因的抒发，是发现新基因的一种有用法式[17， 18]。在转录水平上对外界非生物挟制下植物应答机制的考虑主要荟萃在拟南芥、水稻等植物上，挟制类型以干旱、寒害、盐挟制等为主[19， 20， 21， 22， 23]。对于香烟在低温挟制下基因的特异抒发考虑较少，本考虑模拟南边烟区“倒春寒”，考虑低温挟制对烤烟幼苗光称身手、膜氧化及抗氧化身手的影响，再通过高通量的数字化基因抒发谱时候，分析低温挟制下烤烟幼苗抗寒相干基因的各别抒发谱，寻找低温挟制后与香烟光协作用、抗氧化身手关系的功能基因，为深切分析香烟低温挟制伤害机理、挖掘抗寒相干基因，提高香烟稳健性拔擢等方面提供表面带领。

1 材料与法式 1.1 材料培养与处罚

履行材料为坐褥上大面积拔擢的Msk326(K326)，由云南香烟科学考虑所选育。登科大小一致且饱胀的烤烟种子浸种催芽出苗后，差别移栽于装有养分土的塑料钵内，在3叶期登科大小基本一致烟苗，每钵定苗3株，置于光照培养箱中培养滋长。培养条件：温度为23—25 ℃；光照强度为6000 lx，逐日光照12 h。烟苗长至5—6片真叶时，5—7 ℃低温挟制处罚3 d(秀气为B)，常温23—25 ℃培养为对照(秀气为A)。取其换取部位叶片进行RNA索要和相干生理想法测定。

总RNA索要试剂盒为WASON(RNAex Reagent System Ⅳ)试剂盒，上海华舜生物工程有限公司坐褥，其它均领受国产分析纯试剂。

伪娘 人妖 1.2 履行法式 1.2.1 生理生化想法测定

取处罚(B)和对照(A)叶片，参考崔翠法式[24]，差别测定总叶绿素Chl 含量，Chl a 及Chl b含量，Pn，Gs，Tr，Ci，电解质浸透率，Pro及MDA含量，POD、CAT和SOD活性，GSH及Vc含量等生理想法。每处罚4次重迭，测定数据利用Micorsoft excel 软件进行处罚，利用DPS统计软件进行各别权臣性侦查。

1.2.2 低温挟制后烤烟幼苗叶片基因各别抒发谱的分析

RNA索要法式参考试剂盒操作手册进行，差别取对照(A)和处罚(B)叶片羼杂成两个样品池，从两个样品池中各取羼杂烟叶叶片组织0.5 g附近，索要6 μg总RNA，-78 ℃保存。测序由深圳华大基因科技有限公司承担。领受边合成边测序法(Sequencing by synthesis，SBS)测序[25]。测序所得原始图像数据经base calling 回荡为序列数据。对测序得到的原始标签去除3′adaptor 序列、低质地序列(含未知碱基)以及长渡过小或过大，拷贝数为1的tag，笃定Clean tag。对初步筛选取得的Clean tags进行圭臬化处罚[26]，统计不同tag的溜达特征，分析测序饱胀度。将Clean tags 与基因序列进行比对，笃定Clean tag 代表的基因。通过tags 统计相应基因的抒发量。

从NCBI网站检索mRNA Unigene序列上通盘CATG位点，生成CATG+17碱基的参考标签数据库。将统统clean tags与参考标签数据库比对，允许最多1个碱基错配，对其中唯独比对到1个基因的标签(Unambiguous tags)进行基因防御，统计每个基因对应的原始的clean tag数量，然后对原始clean tag数作念圭臬化处罚，取得圭臬化的基因抒发量，计划基因的抒发水平。圭臬化的法式为：每个基因包含的原始clean tag 数/该样本中总clean tag 数×1000000[26]。参照Audic S.等发表在Genome Research上的数字化基因抒发谱各别基因检测法式[17]。

参考李余良等法式[15]把通盘各别抒发基因向GO(Gene ontology)数据库(http：//www.genetntology.org/)的各个名目映射，找出与统统Tag库布景比较，在各别抒发基因中权臣富集的GO条件和权臣性富集的Pathway黑丝，分析其中与光合及抗氧化身手相干的各别抒发基因。

2 着力与分析 2.1 低温挟制处罚对烤烟幼苗叶片部分光称身手和抗氧化想法的影响

叶绿素与光协作用密切相干，同期亦然计划植物抗寒力上下的一项进攻想法。着力如表 1所示，低温处罚3 d后的叶绿素含量，岂论是叶绿素a (Chl a)也曾叶绿素b (Chl b)含量均权臣下落，讲明低温挟制严重装潢了叶绿素合成；低温处罚后烤烟叶片光称身手镌汰，低温导致净光合速度、气孔导度、蒸腾速度权臣下落。氧目田基的积蓄对细胞存在着雄壮伤害，处罚3 d后烤烟幼苗叶片电解质浸透率、脯氨酸含量及丙二醛含量均权臣上涨，讲明低温挟制已对烤烟幼苗叶片细胞膜酿成一定伤害，但其氧目田基生成速度(形成速度)权臣下落；另外，膜保护酶中CAT及SOD活性权臣上涨，而POD活性则权臣下落；抗氧化物资Vc和GSH含量均权臣上涨。从着力来看，低温挟制3 d后，K326幼苗叶片光称身手下落，细胞膜氧化，但其自身抗氧化身手权臣普及。低温处罚3d后烤烟K326幼苗在光称身手、膜氧化及抗氧化身手方面均发生权臣变化。

2.2 基因各别抒发谱分析 2.2.1 RNA质地检测和测序质地评估

差别索要低温挟制(B)及常温培养(A)的烤烟幼苗叶片的总RNA，样品经NANODrop 2000C 核酸检测仪检测，OD260/OD280均在1.8—2.2限度内，纯度较高。按照检测的浓度，将换取处罚的总RNA等量羼杂。用DNase I降解基因组DNA，电泳线路RNA均保执好意思满性。总RNA用电泳检测标明，28S rRNA和18S rRNA条带明晰可见，无拖带表象，讲明RNA好意思满性较好，可得志实验要求。

测序得到对照样品A 和处罚样品B 原始序列数据，经去除杂质后得到高质地tag(Clean tag)差别有3490430条和3506495条，占总tag数的95.91%和94.69%；仅有5%附近的tag拷贝数小于2或唯有接头序列。通过测序分析，最终得到的clean tag的数量均达到总测序量90%以上，讲明样品制备和测序质地精良。对2个样品Clean tag拷贝数溜达进行分析，线路拷贝数大于100的高抒发Tags 在对照和处罚均差别占63.79%和55.50%，在数量上占十足上风； 拷贝数小于5的低抒发Tags诚然在总拷贝数均差别只占5.94%和7.24%，可是在种类上异常丰富，均达到57%以上，从合座上评估测序数据泛泛。

从NCBI网站上(http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/)下载和香烟相干的参考基因有24432条，参考tag有74261条。通过软件检索Unigene上通盘CATG位点，生成CATG+17碱基的参考标签数据库，其中参考基因中有CATG位点的基因有22263个，唯独的参考标签有72259个。将clean tags差别与参考标签数据库比对，并统计每个基因对应clean tag的数量。对照(A)一个tag完全比对上一个基因的标签(允许1个碱基错配)数量为1066364，占总和的30.55%，种类为16983种，占总和的13.47%；而处罚(B)一个tag完全比对上一个基因的标签(允许1个碱基错配)数量为889559，占总和的25.37%，种类为18619，占总和的12.03%。

2.2.2 低温挟制后烤烟幼苗叶片基因抒发谱分析

经过Unigene标签库进行基因防御后，通过基因比对，设定FDR≤0.001[25]，且倍数各别在2倍以上(∣log2 ratio∣≥1)行动阈值来分析判断基因在2个温度景色下是否各别抒发，筛选出各别抒发基因。低温挟制后(处罚B)与对照A比较较(图 1)，有2357个基因发生了权臣的各别抒发，其中有1673个基因抒发上调，log2 ratio值大于10的有62个，5.00 — 9.99之间的有185个，1.00 — 4.99之间有1426个；684个基因抒发下调，log2 ratio值小于 -10的有11个，-9.99— -5.00之间的有51个，-4.99— -1.00之间的有622个。

通过GO功能富集分析(Gene ontology，简称GO)，对各别抒发权臣的基因进行功能分类防御(图 2)。图 2着力标明，从各别抒发基因所处的细胞位置来看，低温挟制后烤烟幼苗与对照烟苗发生权臣各别抒发的基因主要荟萃在光合系统(Photosystem)、光合膜(Photosynthetic Membrane)、类囊体(Thylakoid Part)、叶绿体(Chloroplast)、质体(Plastid Part)、细胞质(Cell Plastid)、细胞膜(Membrane)等位置，其中与细胞质关系基因发生各别抒发最为权臣，有524个基因发生各别抒发，占总各别抒发基因的45.1%；与生物膜关系的各别抒发基因达到420个，占总各别抒发基因的36.1%；细胞器部分，各别抒发基因达到358个，占总各别抒发基因的30.8%；此外，质体及细胞内细胞器部分等位置各别抒发基因亦均达到27%以上。从分子功能分析着力看，低温挟制导致烤烟幼苗基因的氧化复原身手、跨膜输送身手、结构分子活力发生权臣改变。其中与氧化复原身手相干基因各别最为权臣，各别抒发基因达到196个，占总各别抒发基因的16.3%；与跨膜输送身手相干的各别抒发基因为104个，占总各别抒发基因的8.6%；在结构分子活力方面，各别抒发基因达到74个，占总各别抒发基因的6.1%。发生权臣各别抒发的生物流程主要荟萃在挟制响应、代谢物资及动力的启动反应、光合及光反应，对激素刺激的细胞响应、激素调度的信号阶梯等方面。其中挟制刺激响应的生物流程各别最为权臣，各别抒发基因达到426个，占总各别抒发基因的36.3%；与温度挟制响应相干各别抒发基因为223个，占总各别抒发基因的19.0%；与先导代谢物及动力相干各别抒发基因74个，占总各别抒发基因的6.3%。因此，从各别基因所处的位置、分子功能和影响的生物流程来看，调控烤烟幼苗光协作用和抗氧化身手的基因在低温挟制后发生了较大的各别抒发，为进一步分析提供了基础。

2.2.3 低温挟制对烤烟幼苗叶片光称身手的影响

在生物体内，不同基因互相和谐诈骗其生物学功能，基于Pathway的分析有助于进一步了解基因的生物学功能。KEGG是关系Pathway的主要各人数据库[27]，以KEGG Pathway为单元，应用超几何侦查，进行Pathway权臣性富集分析，在Qvalue≤0.05时，低温对光合天线卵白(捕光色素卵白复合体，light-harvesting chlorophyll protein complex，简写LHC)和光称身手影响各别权臣。参照Kanehisa laboratories的光协作用天线卵白暗示图 3 (a)，秀气权臣各别基因于图 3(b)，并将对应的各别抒发基因列于表 2。从图 3(b)和表 2来看，光系统Ⅰ(photosystem Ⅰ，简写PSⅠ)和光系统Ⅱ(photosystem Ⅱ，简写PSⅡ)中部分捕光叶绿素a/b色素天线卵白(Lhca1、Lhca2、Lhca3、Lhca4、Lhca5、Lhcb1、Lhcb2、Lhcb3、Lhcb4、Lhcb5)等均在低温挟制下发生权臣下调。讲明低温挟制导致烤烟幼苗对光电子的拿获身手下落。

参照Kanehisa laboratories的光协作用暗示图 4(a)，将各别抒发基因差别秀气在图 4(b)，并将对应基因列于表 3。表 3着力标明，低温挟制后烤烟幼苗与光协作用关系的各别抒发基因有35个，其中11个基因抒发上调，24个基因抒发下调。从图 4(b)和表 3来看，在PSⅡ上，上调抒发的基因主要有影响PSⅡ中中枢编码卵白CP47及分子量为44kDa、22kDa等卵白质相干的基因，这些基因主要王法光协作用中世绿体类囊体上PsbC、PsbB、PsbS和PsbZ等卵白；不才能抒发的基因中，部分调度PSⅡ中水裂解酶、水氧化卵白及分子量为10kDa的多肽等相干基因抒发下调，导致PSⅡ中6个中枢编码卵白(PsbO、PsbP、PsbQ、PsbR、PsbW和PsbY)抒发下调；下调抒发基因部分镌汰PSⅠ亚基(PSⅠ-D1、PSⅠ-H、Ⅲ)的前体及PSⅠ反应中心亚基(Ⅱ、IX A、X psaK、XI、XIB)的生成，因此，导致PSⅠ中有9个中枢编码卵白(PsaD、PsaE、PsbF、PsaG、PsaH、PsaK、PsbL、PsaO和PsaN)相干基因均在转录抒发水平上权臣下调。细胞色素b/f复合物 (Cytochrome b6-f complex) 是类囊体膜上可分离出来的多亚基膜卵白。在本考虑中，王法光合电子传递的细胞色素b6/f复合物的部分基因Cytb6发生了上调抒发(PetB卵白抒发上调)、与光合电子传递链关系的卵白PetF、PetH上调，而PetE卵白下调。此外，ATP合成酶复合体关系的基因c卵白基因上调，b卵白基因下调及ATP合成酶(如ATP合酶δ链，ATP合酶c链)发生上调抒发。总之，在光协作用中下调抒发的24个基因中，波及到光协作用的原初反应、光合电子链的传递、光合磷酸化、光合碳同化等主要的代谢通路；部分基因的上调抒发，也提高了烤烟幼苗对低温挟制的稳健。

2.2.4 低温挟制对烤烟幼苗叶片抗氧化身手的影响

5 —7 ℃低温挟制后K326烤烟幼苗代谢通路中，谷胱甘肽代谢阶梯是基因权臣各别抒发权臣富集的最主要生化代谢阶梯之一。鸠合KEGG数据库中谷胱甘肽代谢图将各别基因标注在图 5，并将相干基因信息列于表 4。表 4着力标明，低温提醒烤烟幼苗谷胱甘肽代谢流程各别抒发基因共有26个，其中上调抒发的基因有23个，3个基因下调抒发。上调抒发的基因主如果与谷胱甘肽-s-搬动酶(GSTs)、抗坏血酸过氧化物酶、磷脂过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、6-磷酸葡萄糖酸盐脱氢酶等酶卵白关系的基因。其中，与谷胱甘肽S-搬动酶(GST)相干的基因有13个发生了上调抒发，占总上调抒发基因的50.00%；谷胱甘肽二硫化物和谷胱甘肽之间的代谢流程中各别基因8个，占总各别基因的29.63%，其中，APIC基因(基因登录号为P46440.1|GSTF2_TOBAC)上调抒发最权臣，较对照上涨近1000倍，C-7(基因登录号为CAA45741.1)上调抒发达到500倍，均在捣毁细胞内活性氧及保护细胞回击活性亲电物资时起进攻作用。

3 盘考

香烟滋长最适温度为25— 28 ℃。现在，烤烟大多领受工场化集约飘摇育苗，诚然育苗小环境有所改善，但受当然气温影响仍然很大，当温度降至12 ℃以下会酿成出苗慢、镌汰出苗率及苗期滋长渐渐。南边许多烟区在早春育苗阶段常有“倒春寒”等低温危害发生，一般3 d附近，偶而以致达1周，影响烟苗质地及移栽后还苗期延迟，最终影响烟叶坐褥中、上等烟的比例及优质特色烟叶坐褥。晋艳等考虑了低温挟制0.5—1.5 h后2个香烟品种(云烟85和K326)幼苗的膜透性、脯氨酸含量、膜保护酶和叶绿素含量变化特色[5]，模拟南边烟区“倒春寒”特色，低温挟制3 d后测定烤烟幼苗光称身手、膜氧化和抗氧化身手，考虑着力对烤烟壮苗培育具有进攻参考道理。本考虑着力标明，低温挟制后其叶绿素含量、光称身手权臣下落，细胞膜受损，着力与短期间处罚[5]着力一致，但膜保护酶活性和抗氧化物资(谷胱甘肽和抗坏血酸)含量权臣上涨，抗氧化身手加强，植物自己耐低温身手得到提高。植物在窘境挟制响应下受到多个基因的调控，在窘境条件下渊博基因抒发发生变化，这些基因对相应窘境安谧的取得起到进攻作用[15]。基于测序时候的数字化基因抒发谱具有高通量和高聪惠性的上风，不需要取得地方基因序列，不错从全基因组梗阻同期考虑斗量车载个基因的抒发，能很好反馈生物在滋长发育流程中统统基因组的基因抒发变化情况[27， 28]。因此，咱们领受该基因抒发谱分析时候分析低温处罚3 d后烤烟幼苗叶片的基因各别抒发情况，从中进一步考据基因抒发各别和光称身手、抗氧化身手之间的一致性，发现渊博的上长入下调各别抒发基因，其中部分基因抒发量较高，为进一步利用这些基因提供了表面依据。

在高级植物中大部分的叶绿素分子皆鸠合在PSⅠ和PSⅡ的自然色素卵白复合物上，类囊体膜是光协作用能量编削所需的脂质双层膜，含有捕光及将光能回荡为化学能所必需的色素卵白及酶系统。其中，PSⅡ捕光色素卵白复合物在类囊体膜上的含量最为丰富，它所鸠合的叶绿素约占类囊体膜上色素量的50%[29]。相通PSⅠ捕光色素卵白 (LHC)含有Lhca1、Lhca2、Lhca3 和Lhca4等种卵白质，PSⅡ捕光色素卵白 (LHCII)含有Lhcb1、Lhcb2、Lhcb3、Lhcb4、Lhcb5等卵白质，捕光色素卵白分子量在20 — 29 kD 之间[30]。内囊体膜中有两种捕光天线叶绿素a/b色素卵白复合体，PSⅠ捕光天线叶绿素a/b 色素卵白复合体 (LHCI) 和PSⅡ捕光天线叶绿素a/b色素卵白复合体 (包括LHCII、CP29 、CP26 、CP24 和CP22)。由于LHCII 鸠合有叶片叶绿素总量的50%，在光协作用光能的给与中具有进攻作用。CP29、CP26、CP24 和CP22是PSⅡ捕光天线叶绿素a/b色素卵白复合体中4种主要的亚复合物，含有β-胡萝卜素和叶黄素，参与叶黄素轮回，分散过多的激勉能，对抗光拦截，起到保护反应中心的作用，其中CP22和CP29更围聚PSⅡ中枢复合物。本考虑着力标明，低温挟制后叶绿素a/b鸠合卵白编码基因，岂论是CP22也曾CP29，抒发皆下调，讲明低温挟制后叶片叶绿素捕光身手下落。光协作用的原初反应，即捕光色素分子给与光能，将能量快速高效地传递给光协作用反应中心，进行电荷分离，固定激勉能，经过一系列电子传递设施，将能量回荡为电化学目田能。PSⅡ反应中心老成光能的编削、电子和质子的产生以及分子氧的开释流程的启动。叶绿体PsbA和PsbD 基因编码的D1和D2多肽是PSⅡ RC 的主邀功能卵白，它们鸠合着P680，脱镁叶绿素a和 β-胡罗卜素，况兼含有PSⅡ电子传递链中最进攻的组分Z 和D，还为与水裂解相干的锰簇提供鸠合位点[31]。CP47 和CP43 与反应中心的D1 和D2 卵白细腻联络，除了将外周天线叶绿素a/b鸠合卵白(LHCII、CP29、CP27、CP24、CP22)拿获的激勉能收罗给反应中心外，还具有中枢天线的作用。本考虑发现，低温挟制后香烟CP47(PsbB)和CP43 (PsbC) 相干基因抒发剖判上调，可能是为了稳健天线卵白基因下调的着力，起到一种赔偿作用。光协作用的脱手是从PSⅠ脱手。PSⅠ是电子传递链流程，从低级收受者(Primary acceptor)脱手，经过铁氧化复原卵白(Fd)、细胞色素复合体(Cytochrome Complex)、质体蓝卵白(含铜卵白质)(Pc)后再回到PSⅠ，本文中PSⅠ相干调控各别基因均阐扬为下调抒发，讲明低温影响电子链的传递。光合电子传递是由反应中心启动，由电荷分离所导致的，由PSⅡ和PSⅠ串联起来进行的，其中细胞色素b6/f复合物位于PSⅡ和PSⅠ两者之间。本文中低温导致烤烟细胞色素b6/f复合物上调，光电子传递部分基因上调，部分基因下调，这也可能是烤烟幼苗低温稳健的着力。叶绿素含量上下变化是光协作用进攻的影响身分，也会影响叶片对光能的给与。低温挟制3d后烤烟K326多数叶绿素相干基因处于下调，同期，叶绿素含量较对照权臣下落，考虑着力标明叶绿素总含量变化和行动两种捕光天线叶绿素a/b色素卵白复合体基因下调是相对一致的。同期，K326在低温处罚后，其净光合速度、蒸腾速度、叶片气孔导度等均权臣下落，讲明其光称身手大大下落，与基因抒发谱分析着力一致。

谷胱甘肽是一种在生物体内泛泛存在的活性三肽，具有行动药物、机体异物的解毒剂、机体抗氧化剂、氨基酸输送物资、辅酶等各式生化作用[32]。尤其是可自愿地或在GPX(谷胱甘肽过氧化物酶)催化下来捣毁体内的活性氧，也可通过谷胱甘肽硫搬动酶(GST)催化形成GSX来捣毁活性物资以保护细胞，镌汰氧化毁伤[33]。低温处罚K326后进行基因各别抒发分析着力线路，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、精胺合酶、叶绿体类囊体29kDa卵白等卵白质关系的基因均处于下调抒发，讲明有机体有一套遒劲的自我保护及调控机制来叮咛环境挟制。谷胱甘肽相干基因的上调及下调抒发是其更充分说明回击氧化压力及解毒功能的作用，这种调控与自我保护机制密切相干。本文通过测定K326香烟幼苗叶片中目田基生成速度发现，低温处罚3 d后目田坐褥速度下落，从各别基因抒发情况来看，谷胱甘肽相干基因多处于上调(表 3)，这和目田基坐褥速度下落一致。本文谷胱甘肽上调基因中，主要包含谷胱甘肽S搬动酶、多胺(亚精胺合酶，腐胺氨丙基搬动酶)及抗坏血酸过氧化物酶等类型，均与回击窘境挟制关系。谷胱甘肽和Vc含量在低温处罚后权臣上涨，讲明K326烤烟幼苗通过相干基因上调，提高了其捣毁目田基身手。林元震[34]通过将克隆的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)基因搬动到香烟中进行低温挟制后发现，跟着挟制期间延迟，回荡香烟的SOD、POD活性升高而MDA含量下落，讲明该基因在香烟中的抒发有助于膜保护性酶SOD和POD活性提高及细胞膜贯通，进而提高了转基因香烟的耐低温身手[34]。通过低温挟制处罚K326后，其CAT酶活性上涨，SOD酶活性权臣上涨，POD酶活性则阐扬为权臣下落，这可能与各别基因抒发谱中G-6-PD基因中部分上调、部分处于下调关系。

植物对低温挟制的响应是植物体内一个复杂的流程黑丝，主要包括感应低温信号，信号转导，及引起转录因子与相干功能性基因的各别抒发。植物主要通过气孔关闭、浸透性物资积蓄、活性氧捣毁以及对膜和卵白结构的保护等一系列反应行动对低温挟制的耐受响应。本考虑各别抒发基因波及到烤烟幼苗对低温挟制响应机制的各个方面。此外，还有渊博功能未知基因，这些基因参与多种代谢阶梯，功能抒发多阐扬为上调，少数抒发下调，部分呈现超过10倍的抒发量，这些基因与烤烟幼苗在低温挟制下的生理生态反应将是下一步考虑的主要内容之一。本考虑也取得了一批与耐寒相干的基因，尤其是抗氧化相干的超量抒发基因，为耐寒基因克隆及分子机理考虑奠定了基础。

• 挟制
• 黑丝
• 幼苗
• 考研
• 迪文